液相色譜儀使用時要非常注意,使用卡套柱時,兩端的卡套應(yīng)時刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時候都不能將卡套取下來,否則會造成填料的流失。
液相色譜柱使用注意:
卡套柱的安裝(加預(yù)柱):
將卡套架套入柱芯
將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使夾套高于柱芯
將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片
將“子彈頭”預(yù)柱放入卡套片內(nèi)
將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊
然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
平衡色譜柱
反相色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在乙腈/水中的。請一定確保您所使用的流動相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲存或運(yùn)輸過程中可能會干掉,因此在用流動相分析樣品之前,應(yīng)使用10~20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水“過渡”。
硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過出廠測試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動相,請在使用流動相之前用乙醇或異丙醇平衡。
如何平衡色譜柱?
平衡過程中,將流速緩慢地提高用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對試劑度如果較低,則需要較長的時間來平衡)
色譜柱的再生
進(jìn)行色譜柱再生時,應(yīng)使用一個廉價的泵,我們建議不使用您的液相色譜儀上的泵。
注意:
在對NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時,由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此,應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液*流出。如果簡單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì),用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
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